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 當(dāng)前科技在不斷的發(fā)展，在這種背景下，各種高新技術(shù)不斷的涌現(xiàn)，實(shí)驗(yàn)室內(nèi)常常會(huì)用到分光光度計(jì)，通過對(duì)分 光光度計(jì)的使用，能夠有效的對(duì)物質(zhì)進(jìn)行分析。實(shí)驗(yàn)室內(nèi)常應(yīng)用到的一種分光光度計(jì)為紫外可見分光光度計(jì)，紫外線可見分光 光度計(jì)的吸收光譜，本研究主要就紫外分光光度計(jì)的基本性能，應(yīng)用研究和應(yīng)用范圍等進(jìn)行簡(jiǎn)要的分析，希望所得結(jié)果能夠?yàn)橄?關(guān)領(lǐng)域提供可行參考。 

1854 年，杜包斯克和奈斯勒等發(fā)明了分光光度計(jì)，他們首 次將朗伯比爾定理應(yīng)用于定量分析化學(xué)領(lǐng)域中，并基于此設(shè)計(jì) 了臺(tái)比色計(jì)。到了 1918 年，通過美國(guó)國(guó)家的標(biāo)準(zhǔn)局，成 功地生產(chǎn)出了臺(tái)紫外可見分光光度計(jì)。從這里開始，在以 后的時(shí)間里，紫外可見分光光度計(jì)被不斷的進(jìn)行改造，進(jìn)而接 連的出現(xiàn)了自動(dòng)記錄，自動(dòng)打印，自動(dòng)數(shù)字顯示，微機(jī)控制等 多種儀器，，在這種背景之下，紫外分光光度計(jì)的靈敏度和準(zhǔn) 確性也在不斷的提升。因此其所應(yīng)用的范圍也在不斷的擴(kuò)大， 逐漸地涉及到了生物學(xué)，化學(xué)，醫(yī)學(xué)等多個(gè)領(lǐng)域。對(duì)于紫外可 見分光光度計(jì)應(yīng)用進(jìn)行分析，能夠促使紫外可見分光光度計(jì)更 好地適應(yīng)現(xiàn)代社會(huì)的發(fā)展。 1 紫外可見分光光度計(jì)的基本性能分析 1. 1 紫外可見分光光度計(jì)的結(jié)構(gòu)分析 分析紫外可見分光光度計(jì)，其主要組成為輻射源、單色 器、檢測(cè)器、試樣容器、顯示裝置等部分。輻射源是必須具有 穩(wěn)定和足夠輸出功率的、且能夠提供儀器使用波段的一種連續(xù) 光譜，一般我們所常用到的有鎢燈、鹵鎢燈、氫燈和氘燈等， 也可以采用能夠?qū)θ玖线M(jìn)行調(diào)諧的激光光源; 而單色器，其主 要組成為入射出射狹縫，色散元件，透鏡系統(tǒng)等。這是一種用 來產(chǎn)生高純度單色光束的裝置，分析其主要功能，涉及到將光源產(chǎn)生的復(fù)合光源進(jìn)行分解，分解成為單色光以及所需要的單 色光束［1］; 試樣容器我們也稱之為吸收池，題主要是工程方式 也進(jìn)行吸收光度測(cè)量之用的一個(gè)容器，一般其材料主要可以分 為兩種，一種主要是用于紫外到可見區(qū)，稱之為石英池，而另 一種是用于可見區(qū)，只為玻璃池，分析容器的光程，即一般為 0. 5 ～10 cm; 檢測(cè)器我們也稱之為光電轉(zhuǎn)換器，一般常用到的 有光電管，也有光電倍增管，相對(duì)于光電管來說，光電倍增管 更加靈敏，它更加適用于對(duì)較弱的輻射進(jìn)行檢測(cè)。近這幾 年，在實(shí)踐當(dāng)中也涉及到了對(duì)光導(dǎo)攝像管火宮殿二極管等矩陣 進(jìn)行應(yīng)用，將其當(dāng)做檢測(cè)器，采用這些進(jìn)行檢測(cè)，其特點(diǎn)為掃 描更加快速［2］; 顯示裝置，其發(fā)展比較快，分析較的光度 計(jì)，其一般會(huì)配有微型處理機(jī)，同時(shí)也可能會(huì)涉及到熒光屏顯 示和記錄儀等等，這能夠?qū)D譜，操作條件和相關(guān)數(shù)據(jù)充分的 顯示出來。 1. 2 紫外可見分光光度計(jì)的主要特點(diǎn)分析 分析紫外可見分光光度計(jì)的主要特點(diǎn)，其靈敏度非常高， 而且具有更好的選擇性，通常在現(xiàn)實(shí)當(dāng)中其使用的范圍比較 廣，能夠適用于各種濃度的物質(zhì)，而且這種儀器的使用分析成 本非常低，相對(duì)起來分析更為簡(jiǎn)便，操作簡(jiǎn)單，能夠更加廣泛 地加以應(yīng)用。紫外可見分光光度計(jì)從類型來判斷，主要可以從 單波長(zhǎng)單光束直讀式分光光度計(jì)、雙波長(zhǎng)雙光束分光光度計(jì)以及單波長(zhǎng)雙光束自動(dòng)記錄式分光光度計(jì)3 種類型進(jìn)行分析［3］。 紫外可見分光光度計(jì)可以適用于很多范圍，比如說反應(yīng)動(dòng)力學(xué) 研究，定性和結(jié)構(gòu)分析，對(duì)溶液平衡進(jìn)行研究等。在定量分析 當(dāng)中，一般采用紫外可見分光光度計(jì)主要對(duì)于不同物質(zhì)當(dāng)中的 微量、超微量或常量的無機(jī)及有機(jī)物質(zhì)進(jìn)行測(cè)定。而是反應(yīng)動(dòng) 力學(xué)研究，主要是對(duì)反物質(zhì)濃度隨時(shí)間變化的函數(shù)關(guān)系進(jìn)行分 析，同時(shí)對(duì)其反應(yīng)速度與反應(yīng)級(jí)數(shù)進(jìn)行測(cè)定，有效的對(duì)反應(yīng)機(jī) 理與探討。其也能夠應(yīng)用到定性與結(jié)構(gòu)分析當(dāng)中，紫外吸收光 譜能夠用于對(duì)空間阻礙效應(yīng)推斷，同時(shí)可以分析氫鍵的強(qiáng)度和 互變異構(gòu)，也能夠有效的對(duì)幾何異構(gòu)現(xiàn)象予以分析。其也能夠 對(duì)溶液平衡進(jìn)行分析研究，比如對(duì)絡(luò)合物組成的測(cè)定，測(cè)定其 穩(wěn)定常數(shù)和酸堿離解常數(shù)等等。 2 紫外可見分光光度計(jì)的應(yīng)用原理分析 2. 1 紫外可見分光光度法分析 分析紫外可見分光光度法，主要利用物質(zhì)對(duì)于波長(zhǎng)為200 ～ 760 nm 的電磁波的吸收特性而建立起一種定性、定量與結(jié)構(gòu)的 分析方法。這種分析方法相對(duì)來說度較高，而且操作簡(jiǎn) 單，重現(xiàn)性比較好。而且其波長(zhǎng)長(zhǎng)的光線能量比較小，同時(shí)波 長(zhǎng)短的更新量有很大。分光光度主要對(duì)物質(zhì)分子對(duì)不同波長(zhǎng)以 及特定波長(zhǎng)處的輻射吸收程度進(jìn)行測(cè)量，分析物質(zhì)的吸收光譜 本質(zhì)，其主要是物質(zhì)當(dāng)中的分子以及原子對(duì)入射光中的某些特 定波長(zhǎng)的光能量進(jìn)行吸收，進(jìn)而發(fā)生了一些分子振動(dòng)能級(jí)躍 遷，也可能會(huì)產(chǎn)生電子能級(jí)躍遷的結(jié)果［4］。因?yàn)槲镔|(zhì)具有不同 的分子，也有不同的原子和不同的分子空間結(jié)構(gòu)，而這也導(dǎo)致 了其所吸收的光能量的情況不同。所以不同的物質(zhì)都具有其所 *的固定的吸收光譜曲線，而且能夠根據(jù)吸收光譜上的一些 特征波長(zhǎng)處的吸收光度的高低來對(duì)相關(guān)物質(zhì)的含量進(jìn)行判別和 測(cè)定，而這也是分光光度定性與定量分析的基礎(chǔ)。所以簡(jiǎn)而言 之，風(fēng)光光譜分析主要就是根據(jù)物質(zhì)的吸收，光譜對(duì)物質(zhì)的分 子和結(jié)構(gòu)等情況進(jìn)行研究，其是對(duì)分子結(jié)構(gòu)物質(zhì)間相互作用進(jìn) 行分析的一種十分有效的手段。 2. 2 有機(jī)化合物和無機(jī)化合物的紫外可見吸收光譜 分析 有3 種電子和紫外可見吸收光譜相關(guān)，這 3 種電子分別是 形成斑點(diǎn)的 σ 電子，形成雙鍵的 π 電子以及未參與成鍵的 n 電 子。分析有機(jī)化合物的吸收帶，在紫色光譜當(dāng)中，吸收峰一般 處于光譜中的波帶上，可以依據(jù)電子和分子軌道對(duì)其進(jìn)行分 類，主要能夠分成4 種類型的吸收帶，分別是 R 吸收帶、K 吸 收帶、B 吸收帶和 E 吸收帶。而無機(jī)化合物的紫外可見吸收光 譜主要有，配位場(chǎng)躍遷和電荷遷移躍遷。分別對(duì)這兩種月前進(jìn) 行分析，電荷遷移光譜，存在一些分子奇跡是電子受體也是電 子給體，因?yàn)槭茌椛淠艿挠绊?，電子可以激發(fā)出從給外層 軌道向著受體躍遷的行動(dòng)，這時(shí)會(huì)產(chǎn)生比較大的吸引，而這種 光譜便被稱之為電荷遷移光譜［5］。分析配位躍遷光譜，在配體 存在的基礎(chǔ)上，對(duì)5 個(gè)能量相等的 d 軌道的金屬元素產(chǎn)生過渡 反應(yīng)，這時(shí)會(huì)有7 個(gè)能量相等的 f 軌道分裂，當(dāng)即輻射被吸收 之后，低能態(tài)的 d 電子和 f 電子就會(huì)發(fā)生躍遷情況，這種躍會(huì) 使其遷到高能態(tài)的低軌道或 f 軌道上。而在未被充滿的低軌道 上有很多過渡金屬離子存在。依據(jù)晶體場(chǎng)理論進(jìn)行分析，這些 離子在溶液之中和水以及其他的配體進(jìn)行配合物形成的時(shí)候， 配體的配位場(chǎng)會(huì)對(duì)其產(chǎn)生較為重要的影響，這也會(huì)使得能量相 同的低軌道發(fā)生能級(jí)分裂，終產(chǎn)生了低軌道到低軌道的電子 躍遷情況，但有一個(gè)前提，就是必須在配體的配位場(chǎng)發(fā)生作用的前提之下才可能發(fā)生，所以這種情況也會(huì)被稱之為配備2 月 前，配體的配位場(chǎng)越強(qiáng)，其軌道的分裂能力也會(huì)越大，而其所 吸收的波長(zhǎng)也會(huì)相應(yīng)的減少。 3 紫外可見分光光度計(jì)的應(yīng)用研究 3. 1 紫外可見分光光度計(jì)的應(yīng)用范圍 從某種程度上來說，紫外可見分光光度計(jì)的應(yīng)用范圍較為 廣泛，比如用于定量分析和定性與結(jié)構(gòu)分系統(tǒng)方面。在定量方 面分析，紫外可見光度計(jì)主要對(duì)于各種物料當(dāng)中，進(jìn)行各種無 效的分析，同時(shí)其可也可以對(duì)動(dòng)力學(xué)研究方面進(jìn)行反映，比如 上面所提到的紫外可見光度計(jì)主要可以對(duì)反物質(zhì)具有的濃度進(jìn) 行研究。還能夠在時(shí)間不斷的情況下，對(duì)相應(yīng)函數(shù)的關(guān)系作出 分析。從定性和結(jié)構(gòu)分析方面來說，紫外可見分光光度計(jì)也會(huì) 應(yīng)用到幾何異構(gòu)當(dāng)中等。 3. 2 紫外可見分光光度計(jì)的應(yīng)用實(shí)踐分析 在當(dāng)前時(shí)代背景之下，先進(jìn)技術(shù)和先進(jìn)材料也開始在不同 的領(lǐng)域當(dāng)中有所應(yīng)用，紫外可見分光光度計(jì)，也在不斷的趨于 完善，其一自身所具備*的特點(diǎn)和性質(zhì)作為基礎(chǔ)，為不同的 行業(yè)提供了媒介基礎(chǔ)，而充滿智慧的人們也將紫外可見分光光 度計(jì)應(yīng)用到了各個(gè)領(lǐng)域之中，所以，在當(dāng)今時(shí)代背景之下，其 已經(jīng)成為了新時(shí)代一種主要的研究分析手段［6］。你得將紫外可 見分光光度計(jì)應(yīng)用到現(xiàn)實(shí)社會(huì)的研究工作中，是一種符合客觀 規(guī)律發(fā)展的行為，也能夠促進(jìn)相關(guān)行業(yè)完善，促進(jìn)國(guó)家經(jīng)濟(jì)的 發(fā)展。 當(dāng)前階段，社會(huì)不斷完善，食品安全事件也在不斷的發(fā) 生，為了有效地防止食品安全事件的惡化，升級(jí)和發(fā)展，有關(guān) 部門采取了各種措施進(jìn)行檢測(cè)，但收到的效果甚微。到目前來 說已經(jīng)存在著一些行業(yè)將紫外可見分光光度計(jì)應(yīng)用到了食品檢 測(cè)之中，其能夠有效地對(duì)食品的成分和質(zhì)量進(jìn)行檢測(cè)，確保食 品質(zhì)量安全提升，在某種程度上減少了食品安全事故的發(fā)生。 因此從食品行業(yè)來說即是其發(fā)展道路上的一種重要的助推器。 首先分析光譜測(cè)量在現(xiàn)實(shí)當(dāng)中的應(yīng)用，在這里我們同樣以 食品行業(yè)為例，現(xiàn)如今，一些食品當(dāng)中存在著添加有害添加劑 成分的情況，這會(huì)使得其生產(chǎn)出來的產(chǎn)品會(huì)具有相應(yīng)的色澤， 比如說果汁可樂，這樣通過采用紫外可見分光光度計(jì)的檢測(cè)能 夠有效的區(qū)分食品物資的主要分子結(jié)構(gòu)，對(duì)其吸光值進(jìn)行全面 的定位，可以得出綜合的結(jié)果，確保食品安全。同時(shí)，也可以 利用紫外可見分光光度計(jì)對(duì)食品的色澤進(jìn)行定位，固有顏色進(jìn) 行比較，分析其成品與固有顏色所存在的差異，為更好地使一 些食品的色差滿足相關(guān)要求。因此，相對(duì)來說成分單一的產(chǎn) 品，能夠借助紫外可見分光光度計(jì)，測(cè)量其吸收光度數(shù)值，進(jìn) 而達(dá)到質(zhì)量滿足相關(guān)要求的目的。 其次分析紫外可見分光光度計(jì)的成分定性，從嚴(yán)格意義上 來說，物質(zhì)吸收光譜，主要是物質(zhì)當(dāng)中的一些分子和原子在吸 收和攝入某種特定波長(zhǎng)的光能量之后，在新基礎(chǔ)上發(fā)生的相對(duì) 應(yīng)的分子振動(dòng)，進(jìn)而產(chǎn)生了能級(jí)躍遷，后生成的一種結(jié) 果［7］。因此可以將紫外可見分光光度計(jì)應(yīng)用到醫(yī)學(xué)檢測(cè)當(dāng)中， 即能夠準(zhǔn)確的定量出樣品當(dāng)中某種成分的含量，可以采用這種 分析模式進(jìn)行定量測(cè)定，因此需要先通過對(duì)于一系列已知濃度 的標(biāo)準(zhǔn)溶液 X 值進(jìn)行測(cè)試，然后能夠讀出一系列與之相對(duì)應(yīng)的 Y 吸收光值，然后通過已知濃度 X 值和響應(yīng)值 Y 能夠求出線性 方程: Y =Bx +a。然后通過儀器自動(dòng)計(jì)算，將線性方程的斜率， 截距，等參數(shù)進(jìn)行計(jì)算，后通過該回歸方程求出未知樣品的根據(jù)上述試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行證性試驗(yàn)，在水料比為 50∶1，提 取時(shí)間為2. 5 h，提取溫度為75 ℃進(jìn)行了 3 次平行實(shí)驗(yàn)，實(shí)際 測(cè)得赤靈芝多糖平均提取率為 0. 2012%，相對(duì)誤差為 1. 37%， 說明試驗(yàn)?zāi)Ｐ驮O(shè)計(jì)所得的工藝參數(shù)具有可靠性。 3 結(jié) 論 運(yùn)用響應(yīng)面分析法優(yōu)化了赤靈芝多糖的提取工藝，從而求 得赤靈芝多糖水浸提的工藝條件為: 水料比為 50∶1，提 取時(shí)間為2. 5 h，提取溫度為75 ℃，此時(shí)赤靈芝多糖的提取率 達(dá)到0. 2012%。

濃度。其也能夠采用紫外分光光度計(jì)對(duì)核酸生物學(xué)進(jìn)行分析， 比如相關(guān) DNA 的濃度測(cè)試等［8］。同時(shí)也能夠?qū)?dòng)力學(xué)和時(shí)間 進(jìn)行分析，比如說我們?cè)谘芯考?xì)胞的損傷時(shí)，可以通過對(duì)細(xì)胞 內(nèi)部的線粒體通透性轉(zhuǎn)換孔的測(cè)定進(jìn)行分析，以此來判斷線粒 體受損后其膨脹程度，進(jìn)而能夠推測(cè)出細(xì)胞的損傷程度。在實(shí) 際操作當(dāng)中，需要通過對(duì)線粒體在高唐溶液當(dāng)中透光率的改變 的測(cè)定進(jìn)行分析來實(shí)現(xiàn)。 后是在成分定量方面的分析，因?yàn)榉肿拥淖贤饪梢娢?光譜主要是因?yàn)榉肿赢?dāng)中存在某種基因吸收了紫外可見光之后 產(chǎn)生的電子能級(jí)躍遷而產(chǎn)生的吸收光譜，紫外分光光度分析， 主要是通過物質(zhì)吸收光譜研究物質(zhì)的成分［9］，也可以對(duì)物質(zhì)結(jié) 構(gòu)和其之間相互作用進(jìn)行分析，這是一種帶狀光譜，因此可以 有效對(duì)分子當(dāng)中某些集團(tuán)經(jīng)營(yíng)進(jìn)行顯示，通過 Lambert － Beer 定律我們可以得出光的吸收和吸收層厚度成正比，比爾定律說 明光的吸收與溶液濃度成正比，所以同時(shí)對(duì)吸收層厚度和溶液 濃度的吸收光率影響進(jìn)行考慮，那么可以得到朗伯比爾定律， 即 A = εbc( A 為吸光度，ε 為摩爾吸光系數(shù)，b 為液池厚度，c 為溶液濃度) ，就可以對(duì)溶液進(jìn)行定量分析。將分析樣品和標(biāo) 準(zhǔn)樣品以相同濃度配制在同一溶劑中，在同一條件下分別測(cè)定 紫外可見吸收光譜。若兩者是同一物質(zhì)，則兩者的光譜圖應(yīng)完 全一致。如果沒有標(biāo)樣，也可以和現(xiàn)成的標(biāo)準(zhǔn)譜圖對(duì)照進(jìn)行比 較。這種方法要求儀器準(zhǔn)確，精密度高，且測(cè)定條件要相同。 4 結(jié) 語 本研究主要就紫外可見分光光度計(jì)的相關(guān)原理和應(yīng)用進(jìn)行
分析，中也涉及到了一些筆者自身的見解，因?yàn)樽贤饪梢姺止?光度計(jì)的應(yīng)用有著非常普遍而深遠(yuǎn)的意義，所以其所應(yīng)用的領(lǐng) 域也非常廣泛，筆者相信，在新時(shí)期的背景下，很多領(lǐng)域都將 會(huì)應(yīng)用到紫外可見分光光度計(jì)，因此需要促進(jìn)技術(shù)的成熟，使 其在行業(yè)當(dāng)中得到更好的發(fā)展，也為經(jīng)濟(jì)建設(shè)發(fā)展提供保障。