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UV1800PC紫外可見分光光度計(jì)法檢測(cè)亞硝酸鹽

萘乙二胺分光光度法 

分光光度計(jì)簡(jiǎn)介

紫外分光光度法其比較重要的用途是用于有機(jī)化合物的定性和定量分析方面。因?yàn)楹芏嘤袡C(jī)化合物及其衍生物在紫外波段有強(qiáng)的吸收光譜，可以把未知試樣的紫外吸收光譜圖和標(biāo)準(zhǔn)試樣(或與標(biāo)準(zhǔn)準(zhǔn)圖譜)比較，當(dāng)濃度和溶劑相同時(shí)，若兩者的譜圖相同（峰、極小值和拐點(diǎn)的λ相同），而且未知樣品大體已知時(shí)，可以說明它們是同一個(gè)化合物。但是在紫外和可見光區(qū)域，這些特征的峰、極小值和拐點(diǎn)的數(shù)目往往是有限的，且紫外吸收光譜的吸收峰還較寬，兩種不同的化合物可能有相同的紫外吸收光譜，對(duì)于*未知的有機(jī)化合物，有時(shí)可以通過改換溶劑和適當(dāng)?shù)幕瘜W(xué)處理之后所得的未知標(biāo)準(zhǔn)光譜對(duì)照，不僅比較λ，還要比較它們的λmax和A，來進(jìn)一步確證，甚至還要進(jìn)一步借助紅外、核磁和質(zhì)譜等手段才能zui后得出結(jié)論。    紫外分光光度法進(jìn)行定量分析是有快速，靈敏度高及分析混合物中各組份有時(shí)不需要事前分離，不需要顯色劑，因而不受顯色劑溫度及顯色時(shí)間等因素的影響，操作簡(jiǎn)便等優(yōu)點(diǎn)。目前廣泛用于微量或痕量分析中。但有一個(gè)局限性，就是待測(cè)試樣必須在紫外區(qū)有吸收并且在測(cè)試濃度范圍服從比耳定律才行。    利用紫外光度法測(cè)定試樣中單組份含量時(shí)，通常先測(cè)定物質(zhì)的吸收光譜，然后選擇zui大吸收峰的波長(zhǎng)進(jìn)行測(cè)定。其原理與一般比色分析相同?？捎脴?biāo)準(zhǔn)工作曲線法。如果通過實(shí)驗(yàn)證明，在測(cè)定條件下符合比耳定律，也可以不用標(biāo)準(zhǔn)曲線而與標(biāo)準(zhǔn)品的已知濃度溶液比較求出未知樣品濃度。

紫外可見分光光度計(jì)檢測(cè)亞硝酸鹽的原理

紫外分光光度計(jì)法的使用基于朗伯-比耳定律。朗伯-比耳定律(Lambert－Beer)是光吸收的基本定律，俗稱光吸收定律，是分光光度法定量分析的依據(jù)和基礎(chǔ)。當(dāng)入射光波長(zhǎng)一定時(shí)，溶液的吸光度A是吸光物質(zhì)的濃度C及吸收介質(zhì)厚度l(吸收光程)的函數(shù)。

物質(zhì)的吸收光譜本質(zhì)上就是物質(zhì)中的分子和原子吸收了入射光中的某些特定波長(zhǎng)的光能量，相應(yīng)地發(fā)生了分子振動(dòng)能級(jí)躍遷和電子能級(jí)躍遷的結(jié)果。由于各種物質(zhì)具有各自不同的分子、原子和不同的分子空間結(jié)構(gòu)，其吸收光能量的情況也就不會(huì)相同。因此，每種物質(zhì)就有其*的、固定的吸收光譜曲線，可根據(jù)吸收光譜上的某些特征波長(zhǎng)處的吸光度的高低判別或測(cè)定該物質(zhì)的含量，這就是分光光度定性和定量分析的基礎(chǔ)。分光光度分析就是根據(jù)物質(zhì)的吸收光譜研究物質(zhì)的成分、結(jié)構(gòu)和物質(zhì)間相互作用的有效手段。又因?yàn)樵S多物質(zhì)在紫外-可見光區(qū)有特征吸收峰，所以可用紫外分光光度法對(duì)這些物質(zhì)分別進(jìn)行測(cè)定（定量分析和定性分析）。    

 在酸性介質(zhì)中亞硝酸鹽與磺胺進(jìn)行重氮化反應(yīng)，其產(chǎn)物再與鹽酸萘乙二胺偶合生成紅色偶氮染料，于543 nm波長(zhǎng)測(cè)定吸光值。 

 注意事項(xiàng)：大量的硫化氫干擾測(cè)定，可在加入磺胺后用氮?dú)怛?qū)除硫化氫。

試劑： 除非另作說明，所用試劑均為分析純，水為無亞硝酸鹽的二次蒸餾水或等效純水。 磺胺溶液：10 g/L  稱取5 g碘胺(NH2SO2C6H4NH2)，溶于350 mL鹽酸溶液(1+6)，用水稀釋至500 mL，盛于棕色試劑瓶中，有效期為2個(gè)月。 38.1.3.2  鹽酸萘乙二胺溶液：1 g/L 稱取0.5 g鹽酸萘乙二胺(C10H7NHCH2CH2NH2·2HCl)，溶于500 mL水中，盛于棕色試劑瓶中于冰箱內(nèi)保存，有效期為1個(gè)月。

 亞硝酸鹽氮標(biāo)準(zhǔn)溶液： 

 亞硝酸鹽氮標(biāo)準(zhǔn)貯備溶液：100 μg/mL-N 

    稱取0.492 6 g亞硝酸鈉(NaNO2)經(jīng)110℃下烘干，溶于少量水中后全量轉(zhuǎn)移入1 000 mL量瓶中，加水至標(biāo)線，混勻。加1 mL三氯甲wan(CHCl3)，混勻。貯于棕色試劑瓶中于冰箱內(nèi)保存，有效期為兩個(gè)月。 

亞硝酸鹽氮標(biāo)準(zhǔn)使用溶液：5.0 μg/mL-N 移取5.00 mL亞硝酸鹽氮標(biāo)準(zhǔn)貯備溶液(38.1.3.3.1)于100 mL量瓶中，加水至標(biāo)線，混勻。臨用前配制。

  儀器及設(shè)備 

    ——分光光度計(jì)(723nPC/723SPC/UV1700PC/uv1800pc)；     

——量瓶：100，1 000 mL各1個(gè)；     

——量筒：50，500 mL各1個(gè)； 

    ——具塞比色管：50 mL(帶刻度)，30個(gè)；  

   ——燒杯：100，500 mL，各1個(gè)； 

    ——試劑瓶：棕色500 mL，2個(gè)，1 000 mL，1個(gè)； 

    ——聚乙烯洗瓶：500 mL，1個(gè)；  

   ——自動(dòng)移液管：1 mL，2支；    

 ——刻度吸管：1，5 mL，各1支； 

    ——吸氣球：1只； 

    ——玻璃棒：直徑5 mm，長(zhǎng)15 cm，2支；    

 ——一般實(shí)驗(yàn)室常備儀器和設(shè)備。 38.1.5  分析步驟 

繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線 

 取6個(gè)50 mL具塞比色管，分別加入0，0.10，0.20，0.30，0.40，0.50 mL亞硝酸鹽標(biāo)準(zhǔn)使用溶液(38.1.3.3.2)加水至標(biāo)線，混勻。標(biāo)準(zhǔn)系列各點(diǎn)的濃度分別為0，0.010，

 0.020，0.030，0.040，0.050 mg/L。 

  各加入1.0 mL磺胺溶液(38.1.3.1)，混勻。放置5 min。 

 各加入1.0 mL鹽酸萘乙二胺溶液(38.1.3.2)混勻。放置15 min。 

  選543 nm波長(zhǎng)，5 cm測(cè)定池，以水作參比，測(cè)其吸光值Ai。其中零濃度為標(biāo)準(zhǔn)空白吸光值A0。 

 以吸光值(Ai-A0)為縱坐標(biāo)，濃度(mg/L)為橫坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。 38.1.5.2  水樣的測(cè)定 

  移取50.0 mL已過濾的水樣于具塞比色管中。 

 參照(38.1.5.1.2～38.1.5.1.4)步驟測(cè)量水樣的吸光值Aw。 38.1.5.2.3  量取50.0 mL二次去離子水，于具塞比色管中，參照上述38.1.5.1.2～38.1.5.1.4步驟測(cè)量分析空白吸光值 記錄與計(jì)算 

    將測(cè)得數(shù)據(jù)記錄于分析記錄附錄表A2及表A1中，按式(68)計(jì)算An。 

An=Aw—Ab    ……………………… (68) 

    由An值查工作曲線或按式(69)計(jì)算水樣中亞硝酸鹽氮的濃度。 

ρNO2—N=baAn  ……………………… (69) 式中：ρNO2—N——水樣中亞硝酸鹽氮的濃度，mg/L；              An——水樣中亞硝酸鹽氮的吸光值；               a——標(biāo)準(zhǔn)曲線中的截距；           b——標(biāo)準(zhǔn)曲線中的斜率。 38.1.7  精密度和準(zhǔn)確度 38.1.8  注意事項(xiàng) 

 水樣加鹽酸萘乙二胺溶液后，須在2 h內(nèi)測(cè)量完畢，并避免陽光照射。 38.1.8.2  溫度對(duì)測(cè)定的影響不顯著，但以10～25 ℃內(nèi)測(cè)定為宜。 38.1.8.3  標(biāo)準(zhǔn)曲線每隔一周須重制一次，當(dāng)測(cè)定樣品的實(shí)驗(yàn)條件與制定工作曲線的條件相差較大時(shí)，如更換光源或光電管、溫度變化較大時(shí)，須及時(shí)重制標(biāo)準(zhǔn)曲線。